以上就是翌圣生物为大家整理的同源重组的常见问题及相应的建议，希望对大家有所帮助。如果还有其它更多关于同源重组的问题，欢迎留言或来电。如果您之前在用传统酶的切酶连技术，现对高效的同源重组技术跃跃欲试，那赶快行动起来吧！
产品推荐
翌圣生物将提供高体验满意度的产品解决方案作为责任，追求从实验操作者的视角考量产品性能！在此考量下，为大家推荐以下匠心出品——Hieff CloneTM克隆系列产品。该系列产品克隆效率显著提升，可达95%以上。基于同源重组的方式，该系列产品无需考虑酶切位点，适用于任何载体和任意片段的连接。同时兼具连接反应时间短（20 min）、操作简单等优势。
产品定位
产品名称 / 货号
产品定位
产品特点
产品应用
Hieff Clone™ Plus One Step Cloning Kit / 10911ES
单个片段克隆
无菌克隆；20min完成连接反应；克隆效率高达95%；不受酶切位点限制；片段定向插入；适用于大片段连接
适用于任意功能载体构建
Hieff Clone™ Plus Multi One Step Cloning Kit / 10912ES
1-5个片段克隆
Hieff Clone™ Zero TOPO-TA Cloning Kit / 10907ES
替代T载体，用于Taq酶扩增产物的连接
2min完成连接反应；100%阳性克隆率；用于TA克隆或平末端克隆
基因的保存和基因测序
Hieff Clone™ Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit,MCS-Depleted / 10908ES
替代T载体，用于Taq酶扩增产物的连接，该载体不含多克隆酶切位点
Hieff Clone™ Zero TOPO-Blunt Cloning Kit / 10909ES
替代载体，用于高保真酶扩增产物的连接
Hieff Clone™ Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit,MCS-Depleted / 10910ES
替代T载体，用于高保真酶扩增产物的连接，该载体不含多克隆酶切位点
Hieff Mut™ Site-Directed Mutagenesis Kit / 11103ES
单个点或连续多碱基突变
搭配Hieff Clone系统，克隆效率高达95%
碱基点突变、缺失、插入等
Hieff Mut™ Multi Site-Directed Mutagenesis Kit / 11104ES
不连续多碱基突变
Hieff CloneTM一步法克隆
产品优势● 无需考虑酶切位点：不受插入片段酶切位点的限制，适用于任何载体；插入片段兼容粘性或平末端。
● 设计简单：在插入片段的PCR扩增引物5’端引入20 bp左右与载体末端同源的序列即可。
● 快速：50℃，20 min即可完成重组反应。克隆阳性率可达95%以上。
● 应用广泛：可用于单片段或多片段定向克隆，也可结合Canace高保真酶，应用于定点突变。
客户反馈数据
高效、快速单片段连接
注. A: 阴性对照转化平板; B: 重组质粒转化平板; C: 1和2分别为原始载体和线性化载体浓度检测电泳图; D: 目的片段的浓度检测电泳图; E: 目的片段的菌落PCR鉴定电泳图; F: 1为重组质粒的酶切鉴定电泳图, 2为原始质粒酶切对照图; M: DL10000。pCAMBIA1300载体: 10217bp, 目的片段: 2352bp。
高效、快速多片段连接
注. A: 重组质粒转化平板; B: 1为载体酶切后琼脂糖凝胶电泳图; C: 菌落PCR验证结果, 其中1为原始质粒对照电泳, 2-5为重组质粒, 仅检测867bp的一个目的片段, 6为假阳性; D: 阳性克隆测序结果; M：Marker II。pBR322载体：3996bp，目的片段：576bp+867bp+915bp+647bp。
发表部分文献
[1]. Liu C X, Li X, Nan F, et al. Structure and degradation of circular RNAs regulate PKR activation in innate immunity[J]. Cell, 2019.（IF 36.616）
[2]. Wang Y, Hu SB, et al. Genome-wide screening of NEAT1 regulators reveals cross-regulation between paraspeckles and mitochondria. Nat Cell Biol.2018 Oct;20(10):1145-1158.（IF 20.06）
[3]. Jiang, Y., et al., Plants transfer lipids to sustain colonization by mutualistic mycorrhizal and parasitic fungi[J]. Science, 2017.（IF 37.205）
Hieff CloneTM TOPO克隆
产品优势
平末端和A末端PCR产物均可在瞬间（几秒钟-5分钟）完成连接；
无需并与和热休克，室温5分钟内完成转化；37℃ 10分钟复苏可以涂板；
客户反馈数据
发表部分文献
[1]. Jiang, Y., et al., Plants transfer lipids to sustain colonization by mutualistic mycorrhizal and parasitic fungi[J]. Science, 2017.（IF 37.205）
[2]. Xing, Y.H., et al., SLERT Regulates DDX21 Rings Associated with Pol I Transcription[J]. Cell, 2017. 169(4): p. 664-678.e16.（IF 30.41）
[3] Li X, Liu C X, Xue W, et al. Coordinated circRNA biogenesis and function with NF90/NF110 in viral infection[J]. Molecular Cell, 2017. (IF 14.7)